Фрагменты отчета: «Влияние остеохондроза позвоночного столба на сердечнососудистую систему»
1989, Киев
Исследования проведены на базе научно-исследовательской лаборатории проблем остеохондроза позвоночного столба НИЛЦ Киевского медицинского института им. академика А.А.Богомольца
Руководитель темы и ответственный исполнитель:
вед.н.с., к.м.н. Гонгальский В.В.
Краткая аннотация.
Предполагается проведение поисковых исследований в рамках раздела спецтемы: Влияние остеохондроза позвоночного столба на сердечнососудистую систему.
Тема предусматривает поисковые исследования с целью сравнительного анализа реакций сосудов сердца на внешние и внутренние раздражители в условиях гравитации. В качестве внешних раздражителей предусмотрено применение естественных стимуляционных методик с зонами приложения в местах формирования узла Ganglin Stellatum. Зона исследования будет сужена до нескольких ключевых позвоночных двигательных сегментов с учетом стереотипа дислокаций в условиях гравитации.
Объект исследования — лабораторные животные (кролики).
С целью изучения вариантов вегетативного контроля и регуляции функции сердца предусмотрено применение анализа тканей на уровне световой и электронной микроскопии.
Цель: провести скрининговые исследования для изучения реакций структурных компонентов миокарда при нарушении вегетативной иннервации.
Задачи:
- Определить характер реакции миоцитов и сосудов микроциркуляторного русла миокарда на ирритацию симпатического сегментарного аппарата.
- Изучить характер реакции эндотелия и интерстициальной ткани в рамках аутоиммунного ответа на чужеродный раздражитель.
- Провести сравнительный анализ структурных компонентов миокарда при нарушении вегетативной иннервации сердца и аутоиммуных процессах.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Моделирование процессов проведено с учетом клинических данных, полученных при обследовании пациентов с болями в области сердца без признаков патологии сердечной деятельности (ЭКГ, ЭКГ с нагрузочными пробами). Две группы животных задействованы в эксперименте в рамках сравнительного анализа вертеброгенного болевого синдрома и ишемической болезни сердца на фоне аутоиммунных процессов.
Исследования носили поисковый скрининговый характер. Предполагаемые результаты исследования – развитие изменений в сосудистой стенке при нарушении вегетативной иннервации и при системных аутоиммунных процессах.
В эксперимент ввели 30 животных (кролики, шиншилла) одной линии. 24 животных экспериментальные, 6 – контрольная группа. Животные содержались в идентичных условиях. Контрольная группа была изолирована.
Контрольная группа формировалась из здоровых животных (по 1 на каждый срок). Была выделена и изолирована особая группа животных, имевших неустойчивую функцию кишечника. Первоначально эта группа животных была изолирована и использована для отработки методик электронной микроскопии миокарда. Вместе с тем, электронная микроскопия тканей миокарда показала выраженные изменения реактивного характера с воспалительным компонентом. При посеве содержимого кишечника был высеян бактериальный агент энтерококкового ряда, что позволило использовать эту группу животных в качестве модели для изучения аутоиммунного системного процесса.
Состояние сосудов микроциркуляторного русла миокарда оценивалось в сроки 14, 28, 42, 56, 84 и 168 суток после начла эксперимента. Для трансмиссионной микроскопии брались кусочки миокарда левого желудочка (область верхушки сердца). Обработка материала проводилась согласно общепринятых методов электронномикроскопического анализа с учетом временных факторов [1]. Кусочки материала переносили в раствор фиксатора не позднее, чем через 1-2 минуты после их иссечения. Фиксация проводилась в течение 2 часов на холоде 2% раствором OsO4 [2], pH фиксатора 7,2-7,4. Кусочки обезвоживались при температуре +40С в этаноле возрастающей концентрации, заливались в смесь аралдита и эпона при комнатной температуре [3]. Срезы контрастировались 2% раствором уксусного уранилацетала в 700 этаноле [4] 10 минут и цитратом свинца [5] в течение 15 минут. Ультратонкие срезы изготавливались на ультрамикротоме LKV-III и просматривались в электронном микроскопе ЭМВ – 100БР.
Реакции тканей сосудов сердца при аутоиммунном процесс
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ (приведены иллюстрации без текста)
Рис. 1. Электронномикроскопичесое исследование участка стенки прекапиллярной артериолы с интерстициальной тканью левого желудочка сердца. Реакция сосуда сердца при аутоиммунном реактивном процессе. Видны множественные включения в интерстициальной ткани. Увеличение 24 000.
Рис. 2. Электронномикроскопическое исследование интерстициальной ткани кровеносного сосуда левого желудочка сердца. Скопление иммунокомпетентных клеток в периваскуляроном пространстве левого желудочка при аутоиммунном реактивном процессе (срок 56 суток). Ув.26 000.
Рис. 3. Электронномикроскопическое исследование интерстициальной ктани кровеносного сосуда левого желудочка сердца. Скопление клеточного детрита в интерстициальном пространстве при аутоиммунном реактивном процессе (зерна из разрушенных клеточных органелл, ядерного хроматина). Ув. 28000.
Такая реакция характерна, в том числе, для исхода дегенеративного ожирения клеток.
Распавшиеся фрагменты тканей (детрит) в норме поддается ферментативному перевариванию. При определенных условиях, например – аутоиммунном воспалительном процессе эндотелия, детрит и иные составляющие интерстициальной (околососудистой) жидкости и плазмы оседают на стенке воспаленного сосуда и инфильтрируют его (Рис.4).
Рис. 4. Электронномикроскопическое исследование кровеносного сосуда левого желудочка сердца при аутоиммунном реактивном процессе. Пристеночное включение в области отечной стенки сосуда среднего калибра левого желудочка. Участок утолщения эндотелия с имбибицией («стресс-реакция» эндотелия) (168 суток). Наблюдается характерное утолщение эндителия, сравнимое с формированием бляшки при стензирующем атеросклерозе. Ув. 23 000.
Список литературы (сокращен):
- Мульдияров П.Я. Субмикроскопическая патоморфология ревмокардита.- М.: Медицина, 1979.-216с.
- Caulfield J.B. Effects of varying the venicle for OsO4 in tissues fixation//J.Biophys., Biochem.Citol.-1957.-No.5.-P.827-829.
- Luft J.N. Improvement in epoxy resin embedding methods//J. Biophys., Biochem.Citol.-1961.-No.9 (2)-P.409-414.
- Watson M.L. Staining of tissue section for electron microscopy with healthy metals//J. Biophys., Biochem.Citol.- 1958.-No.4.-P.475-478.
- Reynolds E.S. The use of lead citrate of high pH as an electron-opaque stain in electron microscopy// J.Biophys., Biochem.Citol.-1963.-No.17(1).-P.208-212.
(фрагменты отчета о поисковых исследованиях, 1988-1989 г).